由单一杂交瘤细胞复制代谢的只有分辨一种表位(抗原决定簇)的高纯抗原。小动物肝脏有上百万种不一样的B淋巴细胞系，具备不一样遗传基因不一样的B淋巴细胞生成不一样的抗原。当机体受抗原刺激时，抗原体分子结构上的很多决定簇各自激话每个具备不一样遗传基因的B体细胞。
被激话的B细胞分裂繁衍产生效用B体细胞(浆细胞)和记忆力B体细胞，很多的浆细胞复制生成和代谢很多的抗原分子结构遍布到血液、血液中。
1.免疫力小动物
免疫力小动物是用目地抗原体免疫力小白鼠，使小白鼠造成过敏反应B淋巴细胞的全过程。一般采用6-8周龄雌虫BALB/c小白鼠，依照事先制订的免疫力计划方案开展免疫力注射。抗原体根据血液循环系统或血循环进到颈静脉免疫器官，刺激性相对B淋巴细胞复制，使其活性、繁衍，并分裂变成过敏反应B淋巴细胞。
2.细胞融合
选用二氧化碳汽体处决小白鼠，无菌操作原则取下肝脏，在平皿内挤压成型碾磨，制取脾体细胞悬浮液。将准备好的同系骨髓瘤细胞与小白鼠脾体细胞按一定占比混和，并添加促结合剂聚乙二醇。在聚乙二醇功效下，各种各样网织红细胞可与骨髓瘤细胞产生结合，产生杂交瘤细胞。
3.可选择性塑造
可选择性塑造的目地是挑选结合的杂交瘤细胞，一般选用HAT可选择性培养液。在HAT培养液中，未结合的骨髓瘤细胞因欠缺次黄嘌呤-鸟嘌呤-硫酸铵核糖转移酶，不可以运用挽救方式生成DNA而身亡。未结合的网织红细胞虽具备次黄嘌呤-鸟嘌呤-硫酸铵核糖转移酶，但其自身不可以在身体之外长期性生存也慢慢身亡。只能结合的杂交瘤细胞因为从脾体细胞得到了次黄嘌呤-鸟嘌呤-硫酸铵核糖转移酶，并具备骨髓瘤细胞能無限繁衍的特点，因而能在HAT培养液中生存和繁衍。
4.杂交瘤阳型复制的挑选与复制化
在HAT培养液中生长发育的杂交瘤细胞，只能极少数是代谢预订特异性单克隆抗体的体细胞，因而，务必开展挑选和复制化。一般选用有限稀释液法开展杂交瘤细胞的复制化塑造。选用灵巧、迅速、特异的医学免疫学方式，挑选出能造成所需单克隆抗体的阳型杂交瘤细胞，并开展复制增加。历经全方位评定其所代谢单克隆抗体的丙种球蛋白种类、亚类、特异性、感染力、分辨抗原体的表位以及含量后，立即开展冻存。
被激话的B细胞分裂繁衍产生效用B体细胞(浆细胞)和记忆力B体细胞，很多的浆细胞复制生成和代谢很多的抗原分子结构遍布到血液、血液中。
1.免疫力小动物
免疫力小动物是用目地抗原体免疫力小白鼠，使小白鼠造成过敏反应B淋巴细胞的全过程。一般采用6-8周龄雌虫BALB/c小白鼠，依照事先制订的免疫力计划方案开展免疫力注射。抗原体根据血液循环系统或血循环进到颈静脉免疫器官，刺激性相对B淋巴细胞复制，使其活性、繁衍，并分裂变成过敏反应B淋巴细胞。
2.细胞融合
选用二氧化碳汽体处决小白鼠，无菌操作原则取下肝脏，在平皿内挤压成型碾磨，制取脾体细胞悬浮液。将准备好的同系骨髓瘤细胞与小白鼠脾体细胞按一定占比混和，并添加促结合剂聚乙二醇。在聚乙二醇功效下，各种各样网织红细胞可与骨髓瘤细胞产生结合，产生杂交瘤细胞。
3.可选择性塑造
可选择性塑造的目地是挑选结合的杂交瘤细胞，一般选用HAT可选择性培养液。在HAT培养液中，未结合的骨髓瘤细胞因欠缺次黄嘌呤-鸟嘌呤-硫酸铵核糖转移酶，不可以运用挽救方式生成DNA而身亡。未结合的网织红细胞虽具备次黄嘌呤-鸟嘌呤-硫酸铵核糖转移酶，但其自身不可以在身体之外长期性生存也慢慢身亡。只能结合的杂交瘤细胞因为从脾体细胞得到了次黄嘌呤-鸟嘌呤-硫酸铵核糖转移酶，并具备骨髓瘤细胞能無限繁衍的特点，因而能在HAT培养液中生存和繁衍。
4.杂交瘤阳型复制的挑选与复制化
在HAT培养液中生长发育的杂交瘤细胞，只能极少数是代谢预订特异性单克隆抗体的体细胞，因而，务必开展挑选和复制化。一般选用有限稀释液法开展杂交瘤细胞的复制化塑造。选用灵巧、迅速、特异的医学免疫学方式，挑选出能造成所需单克隆抗体的阳型杂交瘤细胞，并开展复制增加。历经全方位评定其所代谢单克隆抗体的丙种球蛋白种类、亚类、特异性、感染力、分辨抗原体的表位以及含量后，立即开展冻存。