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革兰氏染色结果
2020年07月01日
革兰氏染色(GramStaining)是用于辨别病菌的一种方式:这类染色法运用细菌细胞壁上的微生物物理性质不一样,可将病菌分为两大类,即革兰氏阳性(GramPositive)与革兰氏阳性菌呈阴性(GramNegative)。这一上色方式由荷兰医师汉斯·布拉德·革兰于1884年所创造发明,最开始是用于辨别肺炎链球菌与克雷白氏肺炎菌中间的关联,后营销推广为辨别细菌种类的关键特点之一,对由病菌感染造成的病症的疾病诊断及医治拥有普遍主要用途。革兰氏染色結果是如何的呢?
一、基本原理
根据结晶紫初染和碘液媒染后,在植物细胞内产生了不溶解水的结晶紫与碘的一氧化氮合酶,革兰氏阳性菌因为其植物细胞偏厚、肽聚糖网层级较多且化学交联高密度,故遇酒精或甲苯褪色解决时,因缺水反倒使网眼变小,再再加它没有脂质,故酒精解决不容易出現间隙,因而可以把结晶紫与碘一氧化氮合酶紧紧留到壁内,使其仍呈蓝紫色;而革兰氏阳性菌阴性菌因其植物细胞薄、外膜层脂质成分高、肽聚糖层薄且化学交联度差,在遇脱色剂后,以脂质主导的外膜快速融解,薄而疏松的肽聚糖网不可以阻拦结晶紫与碘一氧化氮合酶的总混,因而根据酒精褪色后仍呈没有颜色,再经过沙黄等鲜红色染剂复染,就使革兰氏阳性菌阴性菌呈鲜红色[1]。
上色的差别主要是阴性与阳性细菌细胞壁的差别所造成的。
血压革兰氏阳性病菌的植物细胞
G细菌细胞壁具备偏厚(20-80nm)而高密度的肽聚糖层,高达50层,占细胞壁成分的40%~95%,它同细胞质的表层紧密相连(图2-9)。有的G细菌细胞壁中带有磷壁酸(teichoic-acid),也称胞壁质(murein),它是凡士林和核糖醇的高聚物,磷壁酸一般以糖或碳水化合物的酯而存有。因为磷壁酸带负电,它在体细胞表面调整正离子浓度值。磷壁酸与细胞生长相关,细胞生长中有自溶素(autolysins)酶类起功效,磷壁酸对自溶有着调整作用,阻拦胞壁过多溶解和壁溶。
假如植物细胞的肽聚糖层被消溶,G体细胞变成原生质体(protoplasts),植物细胞荡然无存,而只留存细胞质。除链球菌感染外,大部分G细菌细胞壁中含非常少蛋白。
血液革兰氏阳性菌呈阴性病菌的植物细胞G—细菌细胞壁比G细菌细胞壁薄(15~20nm)而构造较繁杂,格外膜(outermembrane)和肽聚糖层(2~3nm)(图2-10)。在植物细胞和细胞质膜中间有一个显著的室内空间,称之为壁膜空隙(periplasmicspace)。
外膜G—细菌细胞壁外膜的基本成份是脂多糖(lipopolysaccharide,LPS),它同细胞质膜相似之处也是两层脂质,但除不饱和脂肪酸外还带有含糖量和蛋白。
LPS的含糖量一部分包含关键含糖量和O-特异含糖量。O-特异含糖量由反复支系的碳水化合物化合物分子结构构成,带有已糖(葡萄糖、半乳糖和鼠李糖)和二脱氨已糖。因为糖的种类不一样,使各种各样G—体细胞具备不一样特点的LPS。关键含糖量(corepolysaccharide)的关键成分是酮脱氨心酸(ketodeoxyoctonate,KDO)。
外膜中还带有几类蛋白质,如蛋白、透亮蛋白质。一些蛋白质具备埋孔功效(porin),管控外部分子结构进到体细胞;有的蛋白质分子结构能够做为噬菌体的蛋白激酶;很多G—病菌对高微生物有高致病是由LPS的成份决策的,它的毒副作用成分常称之为毒素累积(endotoxins)。
肽聚糖层G—细菌细胞壁的肽聚糖层太薄,在大肠杆菌和其他病菌中仅有单面。肽聚糖层和外膜的里层中间根据蛋白相互连接。
壁膜空隙G—细菌细胞壁的外膜与细胞质膜中间存有显著的壁膜空隙,一层薄的肽聚糖处在期间,肽聚糖层和细胞质膜中间的空隙较宽,肽聚糖层至外膜中间的空隙窄小。大肠杆菌的壁膜空隙总宽为12~15nm,呈胶胨态。期间带有三类蛋白:水解酶,催化反应食材的基本溶解;融合蛋白质,起动物质装运全过程;有机化学蛋白激酶(chemoreceptors),在趋化性中起功效的蛋白质。
二、上色結果
革兰氏阳性菌呈紫蓝色,革兰氏阳性菌阴性菌呈鲜红色。
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